對于許多高通量篩選(HTS)部門來說，運行通量最大化和分析可靠性愈漸取決于一個關(guān)鍵因素：分析即用型板。這類分析即用型板通常已經(jīng)包含了預(yù)先從儲存庫中以特定濃度制備好的待測。DMSO是常見的溶解化合物的試劑，但DMSO的濃度一旦高于1%，就會顯著影響分析結(jié)果。因此，在制備分析即用型板時，要求準(zhǔn)確地移取納升級含DMSO的樣品儲存液，讓DMSO保持低濃度。微升級以下的液體操作在技術(shù)上具有一定的挑戰(zhàn)性，傳統(tǒng)方法難以精確地確認低至幾十個納升的量取。
mosquito?是一種小體積液體處理儀器，它將低成本的一次性加樣針頭系統(tǒng)和容積式替換移液方式相結(jié)合，來確保零交叉污染。它在X、Y和Z軸的定位精確性優(yōu)于0.05mm。mosquito能夠移取上至1.2 μL、下至 50 nL的體積，而不需要清洗針頭。
這些特征，讓mosquito在將納升級的化合物溶液從存儲庫中轉(zhuǎn)移到分析板上這種復(fù)雜轉(zhuǎn)移操作時，擁有無比的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。從而讓這一在蛋白結(jié)晶領(lǐng)域已享有盛譽的納升級液體處理工作站，越來越多地在各大跨國藥廠和CRO的研發(fā)部得到應(yīng)用，在配制分析即用型板時進行納升級液體分配。
為了評估m(xù)osquito液體處理器的準(zhǔn)確性和精確度，本文使用Artel MVS來驗證了濕式和干式分液中mosquito移取一系列不同目標(biāo)體積的水溶液和DMSO溶液時的精確度和準(zhǔn)確性。
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操作
為了研究mosquito分液的精確性和準(zhǔn)確性，本實驗利用mosquito分別將MVS水溶液樣品和含DMSO的MVS樣品溶液分配至384孔板中；其中含DMSO的樣品溶液是通過混合MVS儲存（染料）液和DMSO溶劑來制備的。隨后利用獨立的分液器將MVS稀釋液或緩沖液分配到孔中。通過MVS測量吸光值來計算每個孔的體積值。
Artel MVS?
Artel MVS能在幾分鐘之內(nèi)可靠地驗證自動化液體處理器的準(zhǔn)確性和精確度。MVS所采用的雙染料比例式光度測定利用了兩種有著不同吸收峰的染料，它們分別為520 nm（紅色）和730 nm（藍色）。六種包含不同濃度紅色染料的樣品溶液，用于檢測儀器在將10 nL-350 μL的全部體積范圍的液體分配到96孔和384孔板時的性能。藍色染料的濃度在全部體積范圍內(nèi)所有樣品溶液中都是恒定的，如同稀釋緩沖液的濃度一樣。因此藍色染料作為內(nèi)標(biāo)，來計算每孔的溶液深度。
自動化液體處理器分配樣品溶液，并稀釋到微滴定板的孔中，然后分別在雙波長下測量每孔的吸光度。MVS應(yīng)用比爾-朗伯定律，利用吸光值來自動計算液體處理工作站的每個移液通道所分配體積的精確度和準(zhǔn)確性。
水溶液的準(zhǔn)確性和精確度結(jié)果
在為優(yōu)化加樣性能所采取的調(diào)整很少的情況下，利用MVS對mosquito分配含DMSO溶液樣品和水溶液樣品的準(zhǔn)確性和精確度性能進行了測定。精確度結(jié)果與mosquito公布的性能參數(shù)進行比較。
圖3顯示了mosquito在分別將水溶液和DMSO溶液分配至干燥的384孔板時所測量得到的精確度性能。對于DMSO，每次體積轉(zhuǎn)移都使用了單獨的加樣針。對于水溶液，對于特定加樣體積的重復(fù)分液，加樣針是重復(fù)使用的；僅在加樣體積改變時才更換加樣針。收集的數(shù)據(jù)顯示了精確度性能在DMSO和水狀樣品溶液中都具有極佳的可比性。mosquito在所測定的各種特定體積下移液，在大多數(shù)情況下，精確度性能比廠家公布的參數(shù)還要好得多。
圖4顯示了MVS所測量得到的mosquito的準(zhǔn)確性。在進行水溶液和DMSO樣品溶液的分液時，mosquito分液的誤差都低于5%。在液體處理器中設(shè)定補償能實現(xiàn)兩種樣品類型加樣準(zhǔn)確性結(jié)果的一致（未顯示）。
水溶液移液的加樣針間差異
在此次性能評估中，水溶液的分配是通過一組16個單獨的加樣針、6次重復(fù)的分液（不更換加樣針）來進行的。每次分配時加樣針之間的差異是通過計算MVS所測得的每個加樣針體積的標(biāo)準(zhǔn)偏差來測定的。圖5顯示，盡管mosquito加樣針是一次性的，但加樣針的性能在多次使用后幾乎沒有改變。此次展示的數(shù)據(jù)僅限于同一個加樣針的6次重復(fù)。
線性
收集的數(shù)據(jù)顯示在分配DMSO溶液和水溶液樣品溶液時，實際的分配體積與預(yù)期體積之間的相關(guān)性水平高，從而證明了mosquito在分配溶劑時的一致性能（圖6）。
結(jié)論
測量結(jié)果表明：無論是水溶液和含DMSO的樣品，mosquito在各種不同體積液體的分配中均表現(xiàn)出了比自身標(biāo)注特性更出色的性能。
MVS能很快且方便地檢測mosquito的準(zhǔn)確性和精確度，只需大約一天的時間即可收集全所有提交的數(shù)據(jù)。
盡管制造廠商并沒有特別強調(diào)mosquito的準(zhǔn)確性（accuracy），但經(jīng)MVS性能檢測結(jié)果表明在分配檢測體積范圍內(nèi)的水性和含DMSO樣品時，無需調(diào)整和校正，誤差也小于5%。
mosquito能可靠地分配不同的液體類型，且有著相同的精確性能。
mosquito的加樣針能使用多次，也不會帶來加樣結(jié)果的差異。
mosquito?儀器特性
零交叉污染
移液體積范圍從50nL到1200nL
幾乎可忽略不計的死體積，減少樣品損耗
滿足96、384和1536孔板格式
移液體積為50nL時差異系數(shù)（CVs）<8%， 100nL時CVs < 4%
準(zhǔn)確性：整體在±5%之內(nèi)
可與其他自動化機器人輕松整合
滬公網(wǎng)安備31011502016460號
